PTEN的表达及其在阿霉素诱导胃癌细胞凋亡中的意义

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目的 研究阿霉素干预胃癌细胞后PTEN的表达及其在阿霉素诱导胃癌细胞凋亡中的意义。方法 (1)阿霉素干预胃癌细胞BGC-823后以四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)和流式细胞法检测细胞存活率及凋亡率,并检测PTEN的mRNA和蛋白水平。(2)构建胃癌裸鼠异位种植瘤,采用原位末端标记(TUNEL)法检测异位种植瘤中胃癌细胞的凋亡情况,并用RT-PCR和Western blot法检测PTEN mRNA和蛋白的表达水平。(3)以PTEN特异性小干扰RNA(siRNA)转染BGC-823细胞,并以阿霉素进行干预,检测BGC-823细胞的存活率和凋亡率以及PTEN蛋白表达水平。结果(1)阿霉素干预后,BGC-823细胞的生存率呈时间依赖性降低。(2)阿霉素能够有效诱导BGC-823细胞凋亡。(3)阿霉素在BGC-823细胞中可时间依赖性地促进PTEN的mRNA和蛋白水平的升高。裸鼠异位种植瘤试验中,阿霉素干预组的凋亡率[(28.11±1.05)%]明显高于对照组[(2.78±1.63)%];阿霉素干预组瘤体组织中PTENmRNA和蛋白水平亦高于对照组(0.5667±0.0043比0.2217±0.0063,0.14±0.26比0.04±0.15,P值均<0.05)。(4)转染与未转染PTENsiRNA的胃癌细胞以阿霉素干预后,PTENsiRNA转染组的PTEN蛋白表达水平明显低于对照组(P<0.0001),且PTENsiRNA转染组[(10.35±1.04)%]凋亡率明显小于未转染组[(31.37±3.58)%],P<0.05。结论 阿霉素干预胃癌细胞后可以抑制其生长,诱导细胞凋亡,PTEN表达水平的升高可能是其机制之一。

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