siRNA逆转K562/A02细胞多药耐药的研究

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目的 研究小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs,siRNA)对白血病多药耐药细胞系K562/A02 mdr1基因和P-糖蛋白(P-gp)表达及功能的影响.方法根据mdr1基因已知序列设计3条含21个碱基的siRNA(si-mdr1-1, si-mdr1-2, si-mdr1-3)及阴性对照(si-neg),在脂质体的介导下转染K562/A02细胞;用RT-PCR分析 mdr1 mRNA的表达;流式细胞术检测P-gp表达和细胞内柔红霉素积累量;MTT法检测阿霉素对K562/A02细胞的半数抑制浓度(IC50).结果 3条siRNA均能不同程度地逆转K562/A02细胞的多药耐药.第3条序列能更有效地封闭mdr1基因,使mdr1 mRNA相对水平下降(58.0±1.54)%;P-gp表达由处理前的(76.0±1.0)%降到处理后的(19.6±1.9)%;对阿霉素药物敏感性的相对逆转效率为70.4%;同时使K562/A02细胞内柔红霉素积累量增加.结论 siRNA可逆转mdr1基因编码蛋白P-gp介导的多药耐药。

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