【摘 要】
:
目的筛选可抑制HeLa细胞p42MAPK表达的siRNA.方法采用体外转录合成的方法,合成针对p42MAPK的siRNA 3条和阴性对照siRNA 1条,并进行Cy-3荧光标记,用脂质体转染HeLa细胞,以判断
【机 构】
:
西安交通大学医学院环境与疾病相关基因教育部重点实验室,西安交通大学医学院附属第一医院,西安交通大学生命与技术学院癌症研究所
论文部分内容阅读
目的筛选可抑制HeLa细胞p42MAPK表达的siRNA.方法采用体外转录合成的方法,合成针对p42MAPK的siRNA 3条和阴性对照siRNA 1条,并进行Cy-3荧光标记,用脂质体转染HeLa细胞,以判断转染效果.应用噻唑蓝(MTF)法和流式细胞仪检测siRNA的作用效果,筛选具有功能的siRNA序列;应用Western blot方法鉴定siRNA抑制p42MAPK表达的效果.结果从3条p42MAPKsiRNA中筛选出2条有效的序列siRNA-2和siRNA-3,与空白对照组、脂质体对照组和随机siRNA-4相比,两者均可诱导HeLa细胞p42MAPK表达下调,Western blot结果分析显示,与随机siRNA-4相比分别下调了1/2和2/3,并抑制HeLa细胞的增殖(P<0.05),同时改变了细胞周期各时相的细胞分布.结论p42MAPK siRNA-2和siRNA-3在体外实验中可沉默目的基因以及抑制HeLa细胞增殖.
其他文献
目的探讨超声心动图对胎儿先天性心脏结构异常诊断的价值.方法2004-01-2005-10江门市妇幼保健院对724例胎儿心脏进行了二维、M型、彩色多普勒血流显像检查.取胎儿四腔心切面,
目的 探讨异体脸面部复合组织移植供体的有效保存方法,以减轻组织缺血缺氧损伤.方法 取狗的脸面部复合组织瓣,分别用4℃生理盐水和UW液灌注、保存,用MTT法检测复合组织瓣取下即刻、保存12、24、48 h的各组织的活力,计算其与未保存组织相比的活力百分比,并进行病理学观察.结果 各种组织用UW液保存48 h后活力仍为未保存组织的75%以上.保存后24、48 h活力百分比与生理盐水组比较差异有统计学意
目的 建立小鼠放射性肺损伤模型.方法 雌性C57BL/6小鼠90只,随机分作2组:(1)对照组(36只)不做任何处理;(2)照射组(54只)全肺单次照射12Gy.于照射后1、24、72 h和1、2、4、8、16、24周,取照射组及相同鼠龄对照组小鼠肺组织,分别用HE、Masson染色在光镜下观察组织病理改变和胶原纤维沉积,免疫组织化学法来观察肺组织基底膜连续性和肺泡表面活性物质的表达.用碱水解法来
本文回顾性分析了2001.01~2004.04本院收住的以发热为首发临床表现的87例老年患者的病因及临床特征,以期提高对老年人发热性疾病的认识和诊疗水平。
对一株烟色红曲Monascus fuliginosus产Monacolin K的固体培养条件进行了优化,并测定了其培养物的急性毒性和降血脂作用.比较了以大米和麦麸为原料的差别.在麦麸培养基上考察
目的 探讨人类成纤维细胞生长因子受体1的Ⅲb亚型(FGFR1-Ⅲb)在TAKA-1胰腺导管细胞增殖中的作用及对有丝分裂激活的蛋白激酶(MAPK)的调节.方法 以脂质体法将人类全长FGFR1-Ⅲb表达质粒pSVK4/FGFR1-Ⅲb稳定转染入TAKA-1胰腺导管细胞,采用Western印迹、Northern印迹、免疫荧光和糖基化分析等方法鉴定FGFR1-Ⅲb在TAKA-1细胞中的表达、分布和结构特征
目的 研究脂蛋白脂酶(lipoprotein lipase, LPL)Ser447Ter基因多态性与动脉粥样硬化性脑梗死(atherosclerotic cerebral infarction, CI)发病的关系及其对血脂水平、颈动脉斑块的影响.方法 对166例CI患者及72名健康成人采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性方法检测LPL Ser447Ter基因多态性,颈动脉超声多普勒检查颈总动脉内
目的 研究成年大鼠嗅球切除后侧脑室外侧壁(SVZ)的形态学变化,探讨嗅球对成年大鼠SVZ神经生发活动的影响.方法 建立成年SD雄性大鼠右侧嗅球切除模型,并分别存活2、4、8、12周
目的 介绍颅颌面部骨折一种新的分类方法--字母-数字编码系统和初步临床应用. 方法解释字母-数字编码系统的编制原则,应用该系统对98例颅颌面骨折患者进行分析,并对字母-数字定级法与简明损伤定级-损伤严重度评分(AIS-ISS)系统的一致性进行探讨. 结果字母-数字编码系统用字母标记颅颌面部各个分区,能对颅颌面部骨折作出危险性评估;可以比较全面地统计出每个患者骨折的部位,为临床救治提供更准确的信息.
目的 研究分析我国人睑裂狭小综合征(BPES)两家系及6例散发病例的基因突变.方法选取染色体3q区域5个微卫星位点D3S3696、D3S1549、D3S3586、D3S1764和D3S1744进行家系连锁分析,应用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序技术对提示连锁的染色体区域内候选基因FOXL2进行突变筛查.结果家系连锁分析,将致病基因定位在3q23区D3S3696至D3S1744之间9.88 cM