【摘 要】
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本研究构建了人生长激素突变体B2036(1)分泌表达载体p TAC-stb2036,并在大肠杆菌W3110菌株中表达。通过单因素分析和正交试验优化发酵培养基组成和培养条件,接种量1%,于菌体
【机 构】
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上海多米瑞生物技术有限公司,正大天晴药业股份有限公司,中国医药工业研究总院上海医药工业研究院创新药物与制药工艺国家重点实验室,
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本研究构建了人生长激素突变体B2036(1)分泌表达载体p TAC-stb2036,并在大肠杆菌W3110菌株中表达。通过单因素分析和正交试验优化发酵培养基组成和培养条件,接种量1%,于菌体生长初期(37℃发酵培养3 h)添加终浓度为0.3 mmol/L的IPTG,之后调整温度为25℃,继续发酵培养18 h,1发酵产量较优化前提高了8倍,达到2.8 mg/L。发酵产物经阴离子交换色谱和反相色谱纯化,得到纯度大于97%的目的蛋白,总收率33.2%。
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