【摘 要】
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构建以TK为基本启动子,其上游由抗氧化反应元件(ARE)调控的报告载体pARE-TK—GFP以期用于化学预防剂的筛选.应用重组PCR技术,分别经3次PCR获得重组TK启动子并克隆入pMD18-T载体中,
【机 构】
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江南大学食品学院,扬州大学动物科学与技术学院,扬州大学医学院
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目(30371031),江苏省教育厅自然科学研究指导性计划资助项目(0410193).
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构建以TK为基本启动子,其上游由抗氧化反应元件(ARE)调控的报告载体pARE-TK—GFP以期用于化学预防剂的筛选.应用重组PCR技术,分别经3次PCR获得重组TK启动子并克隆入pMD18-T载体中,经酶切和测序鉴定正确后连入pEGFP中构建载体pTK—GFP.人工合成的ARE插入TK基本启动子上游,成功构建报告载体pARE-TK—GFP.脂质体转染HepGz细胞并在荧光显微镜下观察有绿色荧光.该载体的成功构建可为各种天然或人工合成的化学预防剂的筛选奠定基础.
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