【摘 要】
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本研究从Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板5种因素对蚕豆序列相关扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)体系进行了优化.结果表明,蚕豆最佳PCR反应体系(25 μL)为:1.0 mmol/L dNTPs,0.5 mmol//L Mg2+,0.4 U Taq 酶,4.0 mmol/L 引物,2.0 mmol/L 的模板.反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环
【机 构】
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青海大学农林科学院,西宁,810016;青海大学生态环境工程学院,省部共建三江源生态与高原农牧业国家重点实验室,西宁,810016
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本研究从Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物、模板5种因素对蚕豆序列相关扩增多态性(sequence-related amplified polymorphism,SRAP)体系进行了优化.结果表明,蚕豆最佳PCR反应体系(25 μL)为:1.0 mmol/L dNTPs,0.5 mmol//L Mg2+,0.4 U Taq 酶,4.0 mmol/L 引物,2.0 mmol/L 的模板.反应程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃复性1 min,72℃延伸1 min,5个循环;94℃变性1 min,50℃复性1 min,72℃延伸1 min,35个循环;72℃延伸5min,4℃保存.利用优化的SRAP标记对12份蚕豆材料进行遗传多样性分析,研究结果表明12个材料明显聚为2个类群,类群中又有亚类.12个蚕豆品种中有些虽然来自同一地区,但亲缘关系却较远,而来自不同地区的蚕豆也显示出来很大差异,说明蚕豆材料具有丰富的遗传多样性.
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