论文部分内容阅读
背景本课题组前期对理冲生髓饮有效组分进行了抗卵巢癌的研究,结果表明中药复方可以抑制卵巢癌细胞增殖,诱导癌细胞凋亡,减少癌细胞黏附,抑制血管新生,由此提出理冲生髓饮有效组分是否可以逆转卵巢癌干细胞耐药这一假说。目的 探讨理冲生髓饮有效组分对卵巢癌干细胞调控相关基因及顺铂耐药性影响及其作用机制。方法2017年10月—2018年4月,选取BALB/C裸鼠48只,构建卵巢癌SKOV3荷瘤鼠模型,将裸鼠分为空白组(给予0.9%氯化钠溶液,12只)、顺铂组(给予顺铂,12只)、中药组(给予理冲生髓饮有效组分混合物,12只)、中药+顺铂组(除给予理冲生髓饮有效组分混合物外同时给予顺铂,12只)。于造模第8天开始给药,共给药18 d。最终空白组死亡4只裸鼠,顺铂组死亡3只裸鼠,中药组死亡1只裸鼠,中药+顺铂组死亡1只裸鼠。绘制各组肿瘤生长曲线。给药结束后处死裸鼠,制备肿瘤组织,HE染色观察肿瘤病理学特征,免疫荧光染色观察肿瘤CD+44、CD+117、CD44、CD117、CD133细胞情况,PCR检测肿瘤Nanog、Oct4、ABCC1 mRNA表达水平,免疫组化法检测肿瘤Nanog、Oct4、ABCC1表达水平。结果 各组在给药第1～7天肿瘤生长速度均逐渐增快;在给药第7～10天中药组和中药+顺铂组肿瘤生长速度明显变慢,而空白组和顺铂组肿瘤生长速度较快;中药组和中药+顺铂组肿瘤在第13天生长体积达到高峰,之后逐渐下降,而空白组和顺铂组肿瘤生长速度仍逐渐增快。顺铂组肿瘤细胞数目明显减少,体积缩小,核分裂象可见,可见大量肿瘤细胞凋亡,间质纤维组织明显增生;中药组肿瘤细胞数目减少,肿瘤组织呈较明显的片状坏死,间质中纤维组织和纤维细胞增生;中药+顺铂组肿瘤细胞数目明显减少,可见大量肿瘤细胞凋亡,间质纤维组织明显增生。肿瘤中可见少量CD+44、CD+117、CD133、CD44、CD117细胞。顺铂组、中药组、中药+顺铂组肿瘤Nanog、Oct4 mRNA表达水平高于空白组(P<0.05);中药组肿瘤Nanog mRNA表达水平高于顺铂组、中药+顺铂组(P<0.05);中药+顺铂组肿瘤ABCC1 mRNA表达水平低于空白组、顺铂组、中药组(P<0.05)。顺铂组、中药+顺铂组肿瘤Nanog表达水平低于空白组(P<0.05);中药组肿瘤Oct4表达水平低于空白组、顺铂组(P<0.05);中药组、中药+顺铂组肿瘤ABCC1表达水平低于空白组、顺铂组(P<0.05)。结论理冲生髓饮有效组分可通过下调ABCC1及其mRNA表达水平使药物流出减少,肿瘤细胞中药物浓度增高,还可通过影响卵巢癌干细胞特性和顺铂敏感性,从而逆转卵巢癌对顺铂的耐药性。