分泌抗人乙酰胆碱受体抗体骨髓杂交瘤细胞的制备及鉴定

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目的:从大鼠骨髓制备抗人乙酰胆碱受体(AchR)的单克隆抗体。方法:在E.coli中表达人AchRα1亚基,Ni-NTA层析纯化包涵体,并经透析复性。用所纯化的蛋白免疫Lewis大鼠诱导重症肌无力,免疫后大鼠的脾脏和骨髓分别与骨髓瘤细胞融合制备单克隆抗体。结果:成功在E.coli中表达了人AchRα1亚基的膜外区,用复性蛋白免疫大鼠诱导出重症肌无力症状。用免疫大鼠的脾脏和骨髓分别制备了单克隆抗体。结论:可以用制备杂交瘤的方法将骨髓B细胞永生化,为进一步研究重症肌无力发病机理和检测奠定了基础。
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