目的：探讨分析甲氨蝶呤药物浓度检测及其临床应用进展。方法采集我院肿瘤科使用MTX患者的静脉血液50份。使用Agilent 1100 HPLC仪器测量样品含量，色谱柱选用Nucleosil C18柱，流动相选用甲醇和磷酸盐缓冲液，二者体积比为15：82。紫外检测波长设置为306nm，流速为1.0ml/min。将血样离心，取50μL血清，加入高锰酸钾溶液75μL（10%浓度），混匀后离心，取上清液100μL加入5μL氢氧化钠溶液（0.4mol/L），混匀后取20μL进样。样品含量用外标法以峰高计算。结果 MTX血清样品在0.1～20.0mg/L的浓度范围内线性关系良好，其浓度X和峰高Y的直线回归方程为Y=0.4987X+0.0658，相关系数r=0.9999，血清最低检测浓度为0.04mg/L。结论使用HPLC方法检测MTX血药浓度，采样量较少，操作简便，结果准确性较高，具有诸多优点。