高致病性禽流感病毒血凝素基因定点突变及其原核表达

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目的改构高致病性禽流感病毒血凝素基因,建立有效的原核表达体系。方法利用位点特异PCR突变技术同义突变HAl基因中的稀有密码子,将改构的HAl基因克隆到pGEX-4T-1载体中建立4T-1-HAl-m^+重组表达质粒,然后转入E.roli BL21 DE3中并用IPTG诱导表达HAl-GST融合蛋白,SDS-PAGE电泳检测目的蛋白,Western印迹分析表达产物的免疫活性。结果 改构的HAl基因能够在大肠埃希菌中有效表达,表达产物能与H5N1亚型高致病性禽流感病毒免疫鼠血清特异性结合:结论提示高致病性禽流
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