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探讨c-Jun在胆红素脑病幼鼠海马神经细胞凋亡中的作用。
方法选取7日龄新生SD大鼠,经小脑延髓池注射胆红素溶液(10 g/L),注射后6 h、12 h断头取脑,重氮反应法检测海马胆红素水平,Nissl染色观察海马神经元的病理变化;Western blot和免疫荧光染色检测c-Jun氨基末端激酶(JNK)、c-Jun及p-c-Jun的表达;ELISA实验和荧光分光光度法测定凋亡相关因子Caspase-3和Caspase-6。
结果小脑延髓池注射胆红素后幼鼠出现不同程度的异常行为学表现,6 h和12 h后海马胆红素水平较对照组显著升高[(44.00±13.00)%(P<0.05)和(96.86±9.00)%(P<0.01)],24 h后海马神经元脱失,Nissl染色浅淡。随着海马胆红素水平增高,JNK蛋白表达水平(2.41±0.15)较对照组(1.00±0.09)增加1.4倍(P<0.05),其下游靶分子c-Jun和p-c-Jun表达水平(1.43±0.16,2.16±0.23)也分别较对照组(1.00±0.13,1.00±0.11)上升0.43倍和1.16倍(P均<0.05)。免疫荧光染色结果显示,胆红素注射6 h后海马及大脑皮质c-Jun和p-c-Jun阳性细胞增多。凋亡相关分子Caspase-3和Caspase-6活性在注射胆红素12 h后开始上升,24 h后分别较对照组增加2.08倍和0.28倍(P均<0.05)。
结论c-Jun蛋白磷酸化在促进胆红素诱发的幼鼠海马神经细胞凋亡中发挥重要作用。