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目的：建立急性分离大鼠皮层神经元的方法。方法：切取活脑组织切片,经Protease酶解消化、孵育后,采用酶加机械分离法制备10~16 d鼠龄的大鼠皮层神经元。作形态学观察,用全细胞膜片钳技术记录其电生理学特性。结果：分离出的神经元倒置相差显微镜下形态保持良好,有较长的轴突;用膜片钳技术证实,80%以上细胞可以记录出电活动,其保存了主要的离子通道活性。结论：成功建立了一种经济、简便的适用于膜片钳技术的大鼠皮层神经元急性分离方法。