目的调查产超广谱β-内酰胺酶大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌临床分布及耐药性分析,指导临床合理用药。方法收集2011年10月-2014年10月我院住院病人送检各类标本,采用VITEK-Ⅱ进行细菌鉴定及药敏试验;采用采用CLSI推荐的双纸片和表型确证试验检测产ESBLs细菌;对阳性患者的抗菌药物应用情况进行调查分析。结果从374株阳性标本检出产ESBLs大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌172株,总检出率46.0%。276株大肠埃希菌中,检出产ESBLs大肠埃希菌132株,检出率为47.8%,检出前第三代抗菌药物使用率81.1%;标本主要从尿液(50.7%)和脓液(16.7%)中检出,科室大多分布于泌尿科病房(40.8%)及普外科病房(12.9%)。98株肺炎克雷伯菌中,检出产ESBLs肺炎克雷伯菌40株,检出率为40.82%,检出前第三代抗菌药物使用率90.0%;标本主要从痰液(37.5%)和脓液(15.0%)中检出,科室大多分布于内科病房(40.0%)及感染科(12.5%)。产ESBLs大肠埃希菌对碳青霉烯类及部分β-内酰胺酶抑制剂复合剂的耐药率分别为6.5%-22.5%,对其他抗菌药物的耐药率分别为36.2%-88.3%。产ESBLs肺炎克雷伯菌对碳青霉烯类、头孢吡肟、左氧氟沙星及部分β-内酰胺酶抑制剂复合剂的耐药率分别为3.1%-28.5%,对其他抗菌药物的耐药率分别为41.9%-88.8%。大肠埃希菌两组产与非产ESBLs菌株对头孢吡肟、亚胺培南、阿米卡星、头孢哌酮/舒巴坦及哌拉西林/他唑巴坦耐药率比较P>0.05,差异不具有统计学意义;肺炎克雷伯菌两组产与非产ESBLs菌株对亚胺培南、头孢哌酮/舒巴坦耐药率比较P>0.05,差异不具有统计学意义。结论制定合理有效的感染控制措施,合理使用抗菌药物,避免及减少产超广谱β-内酰胺酶细菌引起医院感染的暴发流行。