【摘 要】
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目的 研究核桃青皮提取物对CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 将miR-564组、miR-NC组、anti-miR-564组(转染anti-miR-564后用核桃青皮提取物处理)、anti-miR-NC组(转染miR-NC后用核桃青皮提取物处理)用脂质体法转染至CNE-2细胞,部分组用核桃青皮提取物40μg/mL处理.采用MTT法检测核桃青皮提取物(20、40、80μg/mL)处理后对CNE-2细胞的抑制率,伤口愈合测定法、Transwell法检测细胞的迁移和侵袭,Western blot检测靶向
【机 构】
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武汉市第一医院, 湖北 武汉430000
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目的 研究核桃青皮提取物对CNE-2细胞增殖、迁移和侵袭的影响.方法 将miR-564组、miR-NC组、anti-miR-564组(转染anti-miR-564后用核桃青皮提取物处理)、anti-miR-NC组(转染miR-NC后用核桃青皮提取物处理)用脂质体法转染至CNE-2细胞,部分组用核桃青皮提取物40μg/mL处理.采用MTT法检测核桃青皮提取物(20、40、80μg/mL)处理后对CNE-2细胞的抑制率,伤口愈合测定法、Transwell法检测细胞的迁移和侵袭,Western blot检测靶向Xklp2靶蛋白(TPX2)、细胞周期素D1(CyclinD1)、p21、p27、MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达,qRT-PCR法检测miR-564、TPX2 mRNA表达;双荧光素酶报告基因检测实验检测细胞的荧光活性.结果 与0μg/mL组比较,核桃青皮提取物对CNE-2细胞的抑制率增强,下调CyclinD1蛋白表达,上调p21、p27蛋白表达,抑制CNE-2细胞迁移和侵袭,下调MMP-2、MMP-9、MMP-14蛋白表达,上调miR-564表达,下调TPX2的表达,均呈浓度依赖性.miR-564可抑制野生型TPX2的CNE-2细胞荧光活性,其过表达可明显提高CNE-2细胞抑制率,抑制细胞迁移和侵袭,下调CyclinD1、MMP-2、MMP-9蛋白表达,上调p21蛋白表达.抑制miR-564表达可减轻核桃青皮提取物对CNE-2细胞增殖、迁移、侵袭的作用,以及对CyclinD1、p21、MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响.结论 核桃青皮提取物可抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与调控miR-564/TPX2通路有关.
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