论文部分内容阅读
目的 探讨鱼藤酮(rotenone)对多巴胺能神经元的神经毒性作用的机制.方法用神经生长因子(NGF)将PC12细胞诱导分化成多巴胺能神经元的细胞模型,经不同浓度的鱼藤酮处理,观察细胞形态改变,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞活性及代谢状态,磷脂酰丝氨酸外翻法(Annexin-V)检测细胞凋亡,流式细胞术检测细胞凋亡率,α-synuclein、硫磺素T(thioflavin T)染色研究细胞内蛋白聚集情况.结果经鱼藤酮处理24 h后PC12细胞突起样结构消失,细胞体积变小、形态变圆;随着鱼藤酮浓度或作用时间增加,细胞活性进一步下降,呈量效和时效依赖性.与对照组比较,细胞活力在浓度为10 nmol/L鱼藤酮作用24 h时即出现明显下降,吸光度A570值为0.415±0.013(P<0.05);可见Annexin-V呈阳性的早期凋亡细胞;凋亡率在5 nmol/L为7.35%±0.52%(P<0.05),在10 nmol/L为13.30%±1.80%(P<0.01);细胞内出现α-synuclein和硫磺素T 双标染色呈阳性的蛋白聚集.结论鱼藤酮在体外对多巴胺能神经元有毒性作用,可诱导出现细胞凋亡并出现类包涵体, 表明鱼藤酮可能通过影响α-synuclein的代谢而在帕金森病发病机制中起作用。