目的建立新的HCV抗原生物素-亲和素-酶联免疫检测方法(ABS-ELISA)。方法将生物素-亲和素系统与酶联免疫技术相结合,建立用于丙型肝炎病毒抗原检测的方法,分析检测方法的灵敏度、特异度、稳定性及精确度等主要技术指标,并对应用效果进行评价。结果建立的检测方法,对40余种肠道病毒样品均无交叉反应,在第二代HCV-RNA国家标准品的10份阴性标准品中,未检出HCV-Ag阳性样品,在10份HCV-RNA阳性标准品中,检出6份HCV-Ag阳性的样品,表现出良好的特异性;检测试剂CV平均值为6.28%,精密性好;在90份HCV抗体阳性样品中检测出HCV-RNA样品67份(74.44%),检出HCV游离抗原阳性样品30份(33.33%)、HCV总抗原阳性样品68份(75.56%),HCV游离抗原与HCV-RNA两个指标检出率差异有统计学意义(χ2=22.443,P﹤0.01),但HCV总抗原与HCV-RNA检测结果之间差异无统计学意义(χ2=0.037,P﹥0.05);以HCV-RNA检测试剂为金标准,所建立的ABS-HCV抗原检测试剂总抗原检测结果的一致性、灵敏度、特异度、阳性预测值及阴性预测值分别为98.03%、80.60%、98.93%、79.41%、99.00%。结论新建立的HCV抗原ABS-ELISA检测方法特异性好,其灵敏度与荧光定量PCR相近。