【摘 要】
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目的构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系。方法设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌。经菌液PCR和
【机 构】
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广州医科大学附属广州市妇女儿童医疗中心,中山大学附属广州市妇女儿童医疗中心,中山大学附属第一医院,广州医科大学金域检验学院
【基金项目】
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国家自然科学基金项目(81601004,81102248),广东省自然科学基金(2016A030310139,2017A030313906),广东省科技计划项目(2014A020212019)
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目的构建靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9基因编辑系统,并应用于HEK 293T细胞系。方法设计两对靶向CXCR7基因的sgRNAs,分别插入PX458载体中,并转化DH5α大肠埃希菌。经菌液PCR和测序验证,挑选序列正确的sgRNA-CXCR7-PX458质粒,转染HEK 293T细胞,用流式分选转染阳性细胞,提取其DNA,PCR扩增后测序验证。结果经测序验证,成功构建了靶向CXCR7基因的CRISPR/Cas9系统,转染HEK 293T细胞后,测序鉴定发现成功编辑CXCR7基因。结论成功构建了
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