探讨锌指并列基因1(JAZF1)过表达对高脂诱导小鼠脂肪肝肝脏促炎因子的影响及其机制。
方法20只雄性3周C57BL/6J-小鼠及10只转基因过表达(JAZF1-Tg)小鼠分为3组:普通食物喂养野生小鼠组(NF组,n = 10);高脂食物喂养野生小鼠组(HF组,n = 10);高脂食物喂养转基因小鼠组(HJ组,n = 10);各组小鼠均喂养12周。定期检测摄食与体质量,12周后,留取各组小鼠血浆与肝脏组织,测定空腹血糖(FBG) 、血胰岛素(INS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)及丙氨酸氨基转移酶(ALT);用酶法检测肝脏组织甘油三酯含量;用RT-PCR检测小鼠肝脏组织促炎因子肿瘤坏死因子α(TNFα)、单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素8(IL-8)的mRNA表达水平;利用Western blot方法检测肝组织磷酸化-c-Jun氨基末端激酶/c-Jun氨基末端激酶(P-JNK/JNK)、磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38/丝裂原活化蛋白激酶p38(P-P 38 MAPK/P 38 MAPK)、磷酸化-细胞外信号调节激酶/细胞外信号调节激酶(P-ERK/ERK)、人核因子κB抑制蛋白α(IKBα)及内参照β-肌动蛋白的蛋白表达水平。对数据的比较,组间采用方差分析、t检验和χ2检验。
结果(1)HJ组与HF组相比较,体质量、FBG、INS、TC及ALT均明显下降(依次分别为31.19±0.81比36.07±1.43、6.94±0.32比8.14±0.36、31.09±2.12比45.21±3.34、3.05±0.07比3.81±0.08、54.75±4.92比68.09±5.15,P值均< 0.05),TG、FFA差异无统计学意义(0.72±0.05比0.81±0.03、0.81±0.4比0.87±0.03,P值均> 0.05)。(2)HJ组与HF组相比肝脏TG含量差异无统计学意义(35.49±3.17比38.26±3.59,P > 0.05)。(3)与HF组相比,HJ组小鼠肝脏组织TNFα,MCP-1及IL-8 mRNA的表达降低,且差异有统计学意义(2.54±0.36比8.64±0.73、1.19±0.12比3.93±0.18、5.09±0.48比9.09±0.89,P值均< 0.01),P-JNK及P-P38 MAPK的磷酸化水平低于HF组(0.92±0.06比1.51±0.01、1.07±0.04比1.45±0.04,P值均< 0.01),而IKBα蛋白表达高于HF组(0.99±0.06比0.79±0.05,P < 0.01);然而,HJ组与HF组小鼠肝脏组织P-ERK的蛋白磷酸化水平差异无统计学意义(P > 0.05)。
结论JAZF1基因表达上调能够抑制高脂喂养小鼠肝脏组织炎症因子TNFα、MCP-1及IL-8的表达,其调控机制可能与JNK、P 38 MAPK及NF-κB信号通路的激活抑制密切相关。