【摘 要】
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通过凝集素印迹转移电泳和亲和层析技术 ,对岩藻糖糖基化蛋白在肝癌细胞中的作用进行了研究 .在化学诱发的大鼠肝癌过程中 ,分子质量在 2 3ku到 4 0ku范围内与荆豆凝集素 (UE
【机 构】
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复旦大学医学院生物化学与分子生物学系
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通过凝集素印迹转移电泳和亲和层析技术 ,对岩藻糖糖基化蛋白在肝癌细胞中的作用进行了研究 .在化学诱发的大鼠肝癌过程中 ,分子质量在 2 3ku到 4 0ku范围内与荆豆凝集素 (UEA)及扁豆凝集素 (LCA)结合的岩藻糖糖基化蛋白显著减少 ,诱癌至 17~ 2 0周这些条带重新恢复 ,而分子质量为 80ku的条带却在诱癌过程中逐周增加 .比较高、低转移性肝癌细胞的岩藻糖糖基化蛋白 ,发现高转移性肝癌细胞具有多种增强的条带 .利用橘果粉胞凝集素 (AAL)和LCA亲和层析柱分离了这些岩藻糖基化糖蛋白 ,并用这些糖蛋白直接作用于肝癌细胞 ,发现AAL 糖蛋白具有显著抑制肝癌细胞迁移的作用 ,迁移细胞数从对照的 (10 0± 4 9) %下降到 (48 1± 2 5 ) % (P <0 0 1) ,LCA 糖蛋白也有类似作用 .用胰酶和木瓜蛋白酶水解蛋白质部分后 ,形成的糖肽抑制肝癌细胞迁移的作用并不改变 ,甚至增强 .此外直接用肝癌转移灶的组织测定了岩藻糖转移酶活性 ,发现α1,6岩藻糖基转移酶活性显著比正常肝组织高 ,而α1,3岩藻糖基转移酶活性没有显著的改变 .用系列凝集素分析发现这些糖链主要能结合伴刀豆凝集素A ,也能结合E 型及L 型植物凝集素 ,显示这种糖蛋白的糖链可能含有较多的高甘露糖型 .这些结果提示糖链在诱癌过程中结构有了改变 ,使之在
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