乙型肝炎病毒聚合酶基因重组腺病毒表达系统的构建和初步鉴定

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【摘要】

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目的构建乙型肝炎病毒聚合酶基因（RT／RNaseH区段）腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达。方法采用PCR方法从pUC19—1．24HBV质粒中扩增RT／RNaseH区段，将该片段与pCMV—Tag2B载体连接

【作者】

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李晖彭劼王战会周彬余治健王程侯金林

【机构】

：

南方医科大学南方医院感染内科

【出处】

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广东医学

【发表日期】

：

2009年2期

【关键词】

：

HBV 聚合酶重组腺病毒 HBV polymerase recombinant adenovirus

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目的构建乙型肝炎病毒聚合酶基因（RT／RNaseH区段）腺病毒表达系统并初步鉴定其转录表达。方法采用PCR方法从pUC19—1．24HBV质粒中扩增RT／RNaseH区段，将该片段与pCMV—Tag2B载体连接构建腺病毒穿梭载体，将其在Bj5183细菌中重组，获得的重组质粒转染到Ad293细胞中包装，待细胞裂解后收集含病毒的上清并感染Huh7细胞，48h后通过RT—PCR鉴定目的基因转录。结果成功扩增HBV RT区并插入pCMV—Tag2B载体，成功获得腺病毒重组质粒并在AD293中包装成病毒颗粒，病毒颗

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