【摘 要】
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目的:构建调节因-X1(regulatory factor X1,RFX1)过表达慢病毒载体,并观察其对F98细胞增殖的影响.方法:运用PCR技术扩增RFX1,并将其插入慢病毒空载体质粒pITA,构建pITA-RFX1
【机 构】
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山西医科大学汾阳学院生物化学教研室,山西汾阳032200北京大学医学部干细胞中心,北京100083;北京大学医学部干细胞中心,北京,100083;
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目的:构建调节因-X1(regulatory factor X1,RFX1)过表达慢病毒载体,并观察其对F98细胞增殖的影响.方法:运用PCR技术扩增RFX1,并将其插入慢病毒空载体质粒pITA,构建pITA-RFX1慢病毒质粒,经琼脂糖凝胶电泳和测序鉴定正确.将包装慢病毒共转染293T细胞,然后感染F98细胞.利用Western印迹和激光共聚焦验证RFX1过表达情况,用流式细胞仪和CCK-8试剂盒观察转染前后细胞增殖情况.结果:电泳和测序显示慢病毒载体pITA-RFX1构建成功,将其感染F98细胞后过表达RFX1蛋白,同时可以明显抑制细胞的增殖.结论:过表达慢病毒载体构建成功,上调RFX1可以降低恶性胶质瘤细胞的增殖.
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