大鼠胱抑素C腺病毒高效表达载体的构建在大鼠心肌成纤维细胞中的表达

来源 :中华老年心脑血管病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yeluanwu
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目的采用Gateway TM技术构建携带胱抑素C(CysC)基因的重组腺病毒载体,并观察在大鼠心肌成纤维细胞中的表达。方法采用RT—PCR方法从大鼠心肌组织中扩增出CysC基因,将CysC基因经BP重组反应定向克隆至pDONR221载体,获得重组质粒pDONR221-CysC,经PCR及测序验证正确的pDONR221-Cyst与腺病毒载体pAd/CMV/V5-DEST在体外进行LR重组反应,CysC取代pAd/CMV/V5DEST中的ccdB-Cm R基因,获得重组腺病毒载体pAd/CMV/V5DEST—
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