【摘 要】
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目的 探讨骨肉瘤MG63细胞及骨肉瘤多药耐药细胞MG63/Dox对阿霉素的敏感性与miR-138-5p过表达的关系.方法 采用脂质体将miR-138-5p mimics、miR-con分别转染至骨肉瘤MG63细胞及骨肉瘤多药耐药MG63/Dox细胞,分为miR-138-5p过表达MG63细胞组与MG63细胞对照组、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组与MG63/Dox细胞对照组.采用实时荧光定量PCR法检测4组细胞miR-138-5p和多药耐药基因1(muhidrug resistance 1
【机 构】
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河南省人民医院郑州大学人民医院骨科,河南郑州450003
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目的 探讨骨肉瘤MG63细胞及骨肉瘤多药耐药细胞MG63/Dox对阿霉素的敏感性与miR-138-5p过表达的关系.方法 采用脂质体将miR-138-5p mimics、miR-con分别转染至骨肉瘤MG63细胞及骨肉瘤多药耐药MG63/Dox细胞,分为miR-138-5p过表达MG63细胞组与MG63细胞对照组、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组与MG63/Dox细胞对照组.采用实时荧光定量PCR法检测4组细胞miR-138-5p和多药耐药基因1(muhidrug resistance 1,MDR1)mRNA相对表达量;采用MTT法检测4组细胞不同浓度阿霉素(0、1、10、20、40、80 μg/L)下的增殖抑制率;采用Western blot法检测4组细胞P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)蛋白相对表达量.结果 miR-138-5p过表达MG63细胞组(10.15±2.12)、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组(6.69土1.38)miR-138-5p相对表达量分别高于MG63细胞对照组(1.00±0.18)、MG63/Dox细胞对照组(1.00±0.13)(t=7.449,P＜0.001;t=7.110,P=0.001),miR-138-5p过表达细胞转染成功.10、20、40、80 μg/L阿霉素下,miR-138-5p过表达MG63细胞组(0.41±0.04、0.51±0.04、0.67±0.06、0.81±0.07)、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组(0.45±0.04、0.63±0.08、0.78±0.06、0.92土0.06)细胞增殖抑制率分别高于MG63细胞对照组(0.25±0.04、0.34±0.05、0.48±0.04、0.61±0.06)、MG63/Dox细胞对照组(0.34±0.03、0.45±0.04、0.57±0.05、0.62±0.07)(P＜0.05),0、1 μg/L阿霉素下,miR-138-5p过表达MG63细胞组与MG63细胞对照组、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组与MG63/Dox细胞对照组细胞增殖抑制率比较差异均无统计学意义(P＞0.05).miR-138-5p过表达MG63细胞组、miR-138-5p过表达MG63/Dox细胞组MDR1 mRNA(0.55±0.08、0.38±0.10)及P-gp蛋白相对表达量(0.58±0.08、0.30±0.07)分别低于MG63细胞对照组(1.00±0.15、1.01±0.14)、MG63/Dox细胞对照组(1.00±0.11、0.69土0.04)(P＜0.05).结论 miR-138-5p过表达可抑制耐药相关分子MDR1 mRNA和P-gp蛋白的表达,增强骨肉瘤细胞MG63和耐药细胞MG63/Dox对阿霉素的敏感性.
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