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【摘 要】尼群地平为二氢吡啶类钙通道阻滞剂，具有显著而持久的降压及血管扩张作用。固定相为：依利特hypersilBDSC18色谱柱（4.6*250*5u），乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相，检测波长为237nm；尼群地平在40～320μg·mL-1范围内呈良好的线性关系。尼群地平的平均回收率为99.3%。本法简便、重现性好、回收率高，可用于尼群地平片中尼群地平的含量测定。
【关键词】尼群地平片；尼群地平；测定
尼群地平化学名为2，6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸甲乙酯。尼群地平为二氢吡啶类钙通道阻滞剂。尼群地平化具有显著而持久的降压及血管扩张作用[1-3]。尼群地平化用于治疗高血压。目前生产尼群地平片的厂家主要有哈药集团制药总厂、上海信谊天平药业有限公司、陕西春晖药业有限公司、成都第一药业有限公司、云南白药集团大理药业有限责任公司、广东华南药业集团有限公司、合肥久联制药有限公司、安徽省润康药业有限公司、浙江万邦药业股份有限公司、唐山吉祥药业有限责任公司、辽宁康泰药业有限公司、大连泛谷制药有限公司、山西兰花药业有限公司等。本文用高效液相法对尼群地平片中的尼群地平的进行了含量测定。
1.仪器与试药
1.1仪器
EX1600四元低压梯度液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；UV-1800紫外/可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；XYJ-H帕恩特实验室中央超纯水系统（北京湘顺源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；QTSXR10260数控型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；TΜ-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
1.2试药
乙腈（淄博市淄川区鑫川化工厂）、磷酸（湖北巨胜科技有限公司）、盐酸（襄樊金译成精细化工有限公司）、甲醇（商丘市瑞普化工有限公司）、冰乙酸（淄博市淄川区鑫川化工厂）、磷酸氢二铵（淄博市淄川区鑫川化工厂）、四氢呋喃（襄樊金译成精细化工有限公司）。
2.含量测定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[4-13]。色谱柱为依利特hypersil BDSC18 色谱柱（4.6*250*5u）；乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相；检测波长为237nm；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃。理论板数按尼群地平峰计算应不得低于2000。
2.2供试品溶液的制备
取尼群地平片适量，研细，精密称定至容量瓶内，加流动相适量超声溶解，放凉，流动相定容，过0.45μm的滤膜，即得。
2.3对照品溶液的制备
精密称取尼群地平对照品约50mg，置50毫升棕色容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含尼群地平100μg）。
2.4阴性干扰试验
按方中比例取尼群地平片辅料，按照制备工艺方法制成阴性制剂，按2.3项下方法制成供试品溶液，按色谱条件测定。结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与尼群地平相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。
2.5标准曲线的制备
制备浓度为40μg·mL-1、80μg·mL-1、160μg·mL-1、200μg·mL-1、240μg·mL-1、280μg·mL-1、320μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，尼群地平对照品在40～320μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6精密度试验
精密吸取尼群地平对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.63%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7重现性试验
分别称取同批尼群地平片样品6份，分别制备成供试品，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.55%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8稳定性试验
取供试品溶液，分别在0，1，2，3，4h精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品尼群地平峰面积积分值的RSD为0.63%。结果表明尼群地平至少在4h内稳定。
2.9回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的尼群地平对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.83%。
2.10样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定尼群地平片三批样品中尼群地平的含量，结果三批样品的含量分别为标示量的99.3%、100.1%、100.5%。
3.讨论
分别考察乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50），乙腈-甲醇-水 （20∶10：70），乙腈-甲醇-冰乙酸-水（15：15∶3∶67），乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：35∶40），乙腈-甲醇-水（20∶20：60），乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：25：25∶40），磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸氢二铵溶液， 用磷酸调节pH 值6.0）-乙腈（50：50）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相。本实验采用高效液相法对尼群地平片中尼群地平的含量进行测定，为今后对尼群地平片的质量标准修订提供依据。本实验方法是一种简便、准确、安全的测定尼群地平片含量的方法。尼群地平片中尼群地平的含量为标示量的95-105%。
【参考文献】
[1]Kazda S，倪西平.尼群地平抗高血压效能中的利尿作用[J].国外医学.药学分册，1989（06）.
[2]桑举阳.尼群地平及其联合用药的降压效应评价[J].河南诊断与治疗杂志，1995（01）.
[3]陈厚柏，刘伊丽，张荣华，刘仕勤.尼群地平治疗高血压患者血药浓度与抗血小板聚集及降压作用的关系[J].中国循环杂志，1994（02）.
[4]靳春林，王竹林.尼群地平原料药及相关物质的测定方法[J].山东医药工业，1995（04）.
[5]米振清，刘芹.HPLC法测定尼群地平片的含量[J].齐鲁药事，2007（02）.
[6]黄春明，周全，张恒弼，任玉林.气相色谱法测定血浆中尼群地平[J].中国医院药学杂志，1998（08）.
[7]马玉荣，朱代舜.尼群地平片剂的铈量法测定[J].中国医药工业杂志，1995（09）.
[8]张秋荣，查岭，郑东娜，王旭东，刘宏民.HPLC测定复方尼群地平片中尼群地平和氢氯噻嗪的含量[J].中国药学杂志，2007（20）.
[9]朱世民，成全，胡秀贞，彭慈贞.尼群地平几种测定方法的比较[J].药学学报，1988（07）.
[10]岳志华，牛秀华，张启明.关于中国药典与英国药典（2005年版）尼群地平原料和片剂中有关物质检查HPLC方法的比较与讨论[J].中国药品标准，2007（05）.
[11]唐玉红.离效液相色谱法测定尼群地平的含量[J].现代仪器，2003（01）.
[12]黎月玲，郑企琨，黄作君.高效液相色谱法测定尼群地平片的含量[J].中国医院药学杂志，2000（10）.
[13]杜江波.用高效液相色谱法测定血清中尼群地平的浓度[J].陕西医学检验，1998（01）.
【关键词】尼群地平片；尼群地平；测定
尼群地平化学名为2，6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1，4-二氢-3，5-吡啶二甲酸甲乙酯。尼群地平为二氢吡啶类钙通道阻滞剂。尼群地平化具有显著而持久的降压及血管扩张作用[1-3]。尼群地平化用于治疗高血压。目前生产尼群地平片的厂家主要有哈药集团制药总厂、上海信谊天平药业有限公司、陕西春晖药业有限公司、成都第一药业有限公司、云南白药集团大理药业有限责任公司、广东华南药业集团有限公司、合肥久联制药有限公司、安徽省润康药业有限公司、浙江万邦药业股份有限公司、唐山吉祥药业有限责任公司、辽宁康泰药业有限公司、大连泛谷制药有限公司、山西兰花药业有限公司等。本文用高效液相法对尼群地平片中的尼群地平的进行了含量测定。
1.仪器与试药
1.1仪器
EX1600四元低压梯度液相色谱仪（南京科捷分析仪器有限公司）；CO-1000型色谱柱温箱（武汉恒信世纪科技有限公司）；UV-1800紫外/可见分光光度计（上海美谱达仪器有限公司）；XYJ-H帕恩特实验室中央超纯水系统（北京湘顺源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中国公司）；QTSXR10260数控型超声波清洗器（天津市瑞普电子仪器公司）；TΜ-1901 双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）。
1.2试药
乙腈（淄博市淄川区鑫川化工厂）、磷酸（湖北巨胜科技有限公司）、盐酸（襄樊金译成精细化工有限公司）、甲醇（商丘市瑞普化工有限公司）、冰乙酸（淄博市淄川区鑫川化工厂）、磷酸氢二铵（淄博市淄川区鑫川化工厂）、四氢呋喃（襄樊金译成精细化工有限公司）。
2.含量测定
2.1色谱条件
依据查阅文献及考查的结果，确定色谱条件如下[4-13]。色谱柱为依利特hypersil BDSC18 色谱柱（4.6*250*5u）；乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相；检测波长为237nm；流速1.0mL·min-1；柱温：30℃。理论板数按尼群地平峰计算应不得低于2000。
2.2供试品溶液的制备
取尼群地平片适量，研细，精密称定至容量瓶内，加流动相适量超声溶解，放凉，流动相定容，过0.45μm的滤膜，即得。
2.3对照品溶液的制备
精密称取尼群地平对照品约50mg，置50毫升棕色容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇超声波振荡溶解并稀释至刻度，摇匀，即得（每1mL溶液中含尼群地平100μg）。
2.4阴性干扰试验
按方中比例取尼群地平片辅料，按照制备工艺方法制成阴性制剂，按2.3项下方法制成供试品溶液，按色谱条件测定。结果表明：在选定条件下测得的阴性液吸收曲线在与尼群地平相同保留时间处不存在吸收峰，说明此方法具有较强的专属性。
2.5标准曲线的制备
制备浓度为40μg·mL-1、80μg·mL-1、160μg·mL-1、200μg·mL-1、240μg·mL-1、280μg·mL-1、320μg·mL-1的对照品溶液，分别精密吸取10μL注入HPLC，记录色谱图。以峰面积积分值A（μg）为横坐标，进样量为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程。试验表明，尼群地平对照品在40～320μg·mL-1范围内线性关系良好。
2.6精密度试验
精密吸取尼群地平对照品溶液10μL重复进样6次，测定峰面积积分值，对照品峰面积积分值的RSD为0.63%。结果表明，本实验精密度良好。
2.7重现性试验
分别称取同批尼群地平片样品6份，分别制备成供试品，按色谱条件测定含量，并计算样品的RSD值为0.55%，结果表明，此含量测定方法的重现性良好。
2.8稳定性试验
取供试品溶液，分别在0，1，2，3，4h精密吸取供试品溶液注入液相色谱仪，进样测定，供试品尼群地平峰面积积分值的RSD为0.63%。结果表明尼群地平至少在4h内稳定。
2.9回收率试验
采用加样回收试验，取已知含量的同一批供试品各6份，精密称定，分精密添加一定量的尼群地平对照品，按供试品制备所述方法制备供试品溶液，测定含量（同时测定样品含量），计算回收率。6次测定的平均回收率为99.3%，RSD为0.83%。
2.10样品含量测定
依照上述含量测定方法，测定尼群地平片三批样品中尼群地平的含量，结果三批样品的含量分别为标示量的99.3%、100.1%、100.5%。
3.讨论
分别考察乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50），乙腈-甲醇-水 （20∶10：70），乙腈-甲醇-冰乙酸-水（15：15∶3∶67），乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：35∶40），乙腈-甲醇-水（20∶20：60），乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：25：25∶40），磷酸盐缓冲液（0.01mol/L磷酸氢二铵溶液， 用磷酸调节pH 值6.0）-乙腈（50：50）不同比例的流动相，结果以乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相，供试品各峰分离效果最好，故选用乙腈-甲醇-四氢呋喃-水（10：15：25∶50）为流动相。本实验采用高效液相法对尼群地平片中尼群地平的含量进行测定，为今后对尼群地平片的质量标准修订提供依据。本实验方法是一种简便、准确、安全的测定尼群地平片含量的方法。尼群地平片中尼群地平的含量为标示量的95-105%。
【参考文献】
[1]Kazda S，倪西平.尼群地平抗高血压效能中的利尿作用[J].国外医学.药学分册，1989（06）.
[2]桑举阳.尼群地平及其联合用药的降压效应评价[J].河南诊断与治疗杂志，1995（01）.
[3]陈厚柏，刘伊丽，张荣华，刘仕勤.尼群地平治疗高血压患者血药浓度与抗血小板聚集及降压作用的关系[J].中国循环杂志，1994（02）.
[4]靳春林，王竹林.尼群地平原料药及相关物质的测定方法[J].山东医药工业，1995（04）.
[5]米振清，刘芹.HPLC法测定尼群地平片的含量[J].齐鲁药事，2007（02）.
[6]黄春明，周全，张恒弼，任玉林.气相色谱法测定血浆中尼群地平[J].中国医院药学杂志，1998（08）.
[7]马玉荣，朱代舜.尼群地平片剂的铈量法测定[J].中国医药工业杂志，1995（09）.
[8]张秋荣，查岭，郑东娜，王旭东，刘宏民.HPLC测定复方尼群地平片中尼群地平和氢氯噻嗪的含量[J].中国药学杂志，2007（20）.
[9]朱世民，成全，胡秀贞，彭慈贞.尼群地平几种测定方法的比较[J].药学学报，1988（07）.
[10]岳志华，牛秀华，张启明.关于中国药典与英国药典（2005年版）尼群地平原料和片剂中有关物质检查HPLC方法的比较与讨论[J].中国药品标准，2007（05）.
[11]唐玉红.离效液相色谱法测定尼群地平的含量[J].现代仪器，2003（01）.
[12]黎月玲，郑企琨，黄作君.高效液相色谱法测定尼群地平片的含量[J].中国医院药学杂志，2000（10）.
[13]杜江波.用高效液相色谱法测定血清中尼群地平的浓度[J].陕西医学检验，1998（01）.