【摘 要】
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目的:研究G蛋白偶联受体30 (G protein-coupled receptor 30,GPR30)对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡能力的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:将靶向GPR30的shRNA (shRNA-GPR30)
【机 构】
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南京医科大学附属无锡人民医院妇产科,江苏无锡214023;南通大学附属妇幼保健院妇产科,江苏南通226000
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目的:研究G蛋白偶联受体30 (G protein-coupled receptor 30,GPR30)对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡能力的影响,并探讨其可能的作用机制.方法:将靶向GPR30的shRNA (shRNA-GPR30)或携带有GPR30全基因的慢病毒(LV-GPR30)分别导入子宫内膜癌Ishikawa和KLE细胞中,构建沉默GPR30和过表达GPR30的细胞株,然后用蛋白质印迹法检测转染效率.采用CCK-8法检测沉默或过表达GPR30对子宫内膜癌细胞增殖能力的影响,采用FCM法检测沉默或过表达GPR30对子宫内膜癌细胞凋亡能力的影响.采用实时荧光定量PCR及蛋白质印迹法检测沉默或过表达GPR30对内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78 (glucose-regulated protein 78,GRP78)和内质网应激的未折叠蛋白反应信号通路关键分子蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like endoplasmic reticulum kinase,PERK)、肌醇需求酶1(inositol-requiring enzyme 1,IRE1)、活化转录因子6 (activating transcription factor 6,ATF6)的表达水平变化.结果:GPR30分别在Ishikawa和KLE细胞中被沉默或过表达.沉默GPR30后,子宫内膜癌细胞的增殖能力下降,凋亡率升高(P值均＜0.01);过表达GPR30后,子宫内膜癌细胞的增殖能力增强,凋亡率降低(P值均＜0.01).沉默GPR30可下调子宫内膜癌细胞中GRP78、PERK、IRE1和ATF6的表达水平,过表达GPR30可上调子宫内膜癌中GRP78、PERK、IRE1和ATF6的表达(P值均＜0.01).结论:沉默GPR30可抑制子宫内膜癌细胞的增殖能力,促进细胞凋亡;过表达GPR30可促进子宫内膜癌细胞的增殖能力,并抑制细胞凋亡.推测该机制可能与内质网应激途径的未折叠蛋白反应有关.
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