【摘 要】
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试验旨在研究胰岛素联合利奈唑胺是否同时具有降糖、抗菌以及抑制a-溶血素活性,从而抑制糖尿病细菌性肺炎.本研究通过体外试验探讨了联合用药对高糖和金黄色葡萄球菌α-溶血
【机 构】
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吉林大学动物医学学院人兽共患病研究所,长春130062
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试验旨在研究胰岛素联合利奈唑胺是否同时具有降糖、抗菌以及抑制a-溶血素活性,从而抑制糖尿病细菌性肺炎.本研究通过体外试验探讨了联合用药对高糖和金黄色葡萄球菌α-溶血素共同诱导的巨噬细胞炎症反应的作用,并探讨其机制.通过药物敏感试验测定最小抑菌浓度(MIC);通过检测D600nm值绘制生长曲线来考察胰岛素、利奈唑胺单独或联合胰岛素的抗菌活性;通过溶血试验考察药物组合对a-溶血素活性的抑制效果;通过细胞毒性试验判定药物组合的体外安全性;借助Western blotting药物组合对炎症通路蛋白的作用.药物敏感性试验结果显示,胰岛素组未检测到金黄色葡萄球菌8325-4株和DU1090株的MIC值,利奈唑胺和胰岛素＋利奈唑胺药物组合对这两种金黄色葡萄球菌的MIC均为0.5 μg/mL;由生长曲线结果可知,胰岛素不抑制正常组和高糖组金黄色葡萄球菌的生长,但是在利奈唑胺组和胰岛素＋利奈唑胺药物组合组,0.25～4 μg/mL利奈唑胺可抑制金黄色葡萄球菌的生长;溶血试验结果显示,正常组和高糖组胰岛素均不抑制α-溶血素活性,0.25～4μg/mL利奈唑胺均可抑制a-溶血素活性;细胞毒性试验显示,正常组和高糖组,细胞存活率均大于88.038％,50 nmol/L胰岛素、0.25 μg/mL利奈唑胺、50 nmol/L胰岛素+0.25 μg/mL利奈唑胺药物组合可提高高糖诱导的M H-S细胞存活率;Western blotting结果显示,50 nmol/L胰岛素单独使用对高糖和α-溶血素共同诱导小鼠肺泡巨噬细胞(M H-S细胞)中TLR2、MAPKs及NLRP3蛋白的表达水平没有抑制作用,而50 nmol/L胰岛素联合0.25 μg/mL利奈唑胺可降低高糖和α-溶血素共同诱导MH-S细胞中上述蛋白的表达水平,其抑制作用比单独使用利奈唑胺时显著.综上所述,胰岛素联合利奈唑胺可通过降糖、抗菌和抑制α-溶血素活性的方式抑制小鼠肺泡巨噬细胞炎症反应.
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