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采用紫外光谱法快速测定了葡萄糖两相水解液中的5-羟甲基糠醛（5-HMF）的摩尔浓度，实验表明：以5-HMF为标准品，蒸馏水替代葡萄糖的水一二甲基亚砜两相溶液为空白，在284nm波长处对其中的5-HMF进行了定量分析。测定结果表明，溶液中的5-HMF摩尔浓度在0～0，10mmol／L范围内与其吸光度值呈现良好的线性关系，并且重现性良好。该方法在抗干扰性实验、精密度实验、回收率实验、稳定性实验和检出限方面均有满意表现，适于快速、准确地测定5-HMF摩尔浓度。