【摘 要】
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目的 基于免疫层析技术,开发一种新型半定量精斑检测试剂条. 方法 采用双抗体夹心法,其中1株PSA单克隆抗体和1株羊抗小鼠IgG多克隆抗体分别包被在硝酸纤维素膜的T线(有两条线
【机 构】
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佛山市顺德区公安局刑事侦查大队,广东 佛山,528300广东顺德工业设计研究院,广东 佛山,528300;
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目的 基于免疫层析技术,开发一种新型半定量精斑检测试剂条. 方法 采用双抗体夹心法,其中1株PSA单克隆抗体和1株羊抗小鼠IgG多克隆抗体分别包被在硝酸纤维素膜的T线(有两条线——T1和T2)和C线上;另外1株PSA单克隆抗体用彩色微球进行标记后,固定在玻璃纤维素膜上,制备成精斑检测检测卡,对其灵敏度及特异性等性能进行评估后,测试以下4个PSA内部校准品浓度(4ng/mL、40ng/mL、200ng/mL、500ng/mL),并对45份标本进行检测(其中有13份为陈旧精斑). 结果 该方法的灵敏度为4ng/mL,检测的符合率为100％,检测高浓度样品(500ng/mL)时无明显的HOOK效应.能通过T1、T2线的显色情况判断检测样品的大致浓度,如当标准品浓度为4ng/mL时,仅有一条T1线及C线显色;当标准品浓度为40ng/mL时,T1、T2及C线均能显色,且T1线显色强度大于T2线;当标准品浓度为200ng/mL时,T1、T2及C线均能显色,且T2线显色强度大于T1线.结论 建立了一种操作简便、灵敏度高,有良好准确性和重复性,可以有效避免HOOK效应且能对检测样品进行半定量检测的精斑试剂条检验方法.
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