论文部分内容阅读
目的 建立超高效液相色谱-串联质谱(ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)同时测定血清中25-羟基维生素D2[25-hydroxyvitamin D2, 25(OH)D2]、25-羟基维生素D3[25-hydroxyvitamin D3,25(OH)D3]和维生素K1(vitamin K1,VK1)的方法,并用此方法诊断维生素缺乏症,评估人群营养状况。方法 血清标本采用乙腈沉淀血清蛋白,正己烷提取。采用BEH C18色谱柱(100 mm × 2.1 mm,1.7 μm)进行分离,以甲醇-0.1%甲酸水溶液梯度洗脱。质谱采用电喷雾正离子模式和多反应监测检测。以稳定同位素标记的d6-25(OH)D3、d7-维生素K1作为内标定量。结果 25(OH)D2、25(OH)D3和维生素K1分别在浓度为5.0~75.0 ng/mL、2.0 ~81.5 ng/mL和 0.3~12.0 ng/mL的范围内呈良好线性关系,相关系数 r>0.995;检出限分别为1、0.25和0.1 ng/mL,定量限分别为3、0.75和0.3 ng/mL;血清基质中3种维生素高中低3个浓度水平的测量精密度均<5.0%、加标回收率为98.5%~104.3%(n=6)。结论 本研究建立的UPLC-MS/MS方法检测血清中25(OH)D2、25(OH)D3和维生素K1灵敏度高、准确性好,适用于人群维生素D及维生素K1营养状况的监测。