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目的 体外克隆及构建带信号肽的人表皮生长因子(hEGF)基因真核表达质粒.方法设计人表皮生长因子(hEGF)基因和信号肽基因引物,采用RT-PCR技术从胎肾组织总RNA中扩增出hEGF基因和信号肽基因序列,克隆入pGEM-T载体,酶切鉴定和序列分析后经T4连接酶连接并克隆入表达质粒pcDNA3.1(+),再次酶切鉴定和序列分析.结果RT-PCR扩增产物电泳获得约90 bp和180 bp条带,与hEGF及其信号肽cDNA大小符合;克隆入T载体后经序列分析与hEGF及信号肽基因一致,克隆入pcDNA3.1(+)质粒后双酶切获得约230 bp和5.4kb条带,再次测序与hEGF cDNA一致.结论成功构建带信号肽的hEGF基因的真核表达质粒。