猪细小病毒PPV-SD1株VP2全基因的克隆及原核表达

来源 :畜牧与兽医 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lkh007
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为研究猪细小病毒PPV—SD1分离株的VP2蛋白的结构与功能,自行设计引物,通过PCR扩增的方法,获得VP2全基因,克隆到pMD18-T载体中进行测序,然后亚克隆到pET30a(+)表达载体中,构建并筛选出阳性重组子,标记为pET30a—VP2。将阳性重组质粒转化进Rosetta^TM主菌中,通过改变IPTG浓度、诱导温度和诱导时间,使重组蛋白获得表达,并确定最佳诱导条件为:IPTG终浓度1.0amol/L、诱导温度37℃、诱导时间为3—4h。经SDS—PAGE和Western—blotting分析表明该
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