O139霍乱弧菌质粒基因组文库的建立及O—抗原基因的筛选

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合成O-抗原的基因是串联在一起的一个基因族,提取O139霍乱弧菌基因组DNA,限制性内切酶EcoR2Ⅰ酶切,电泳回收4-20kb的DNA片段,构建质粒基因组文库。随机筛选重组克隆,获得一株可与O139霍乱弧菌抗菌清发生凝集反应的重组克隆,命名为大肠杆菌DH5α(pMG320)。经鉴定分析重组克隆所表达的O-抗原具有良好的免疫性及反应原性。酶切分析质粒pMG320,推知其O-抗原基因大 4.6kb.这为今后O139霍乱疫苗的研制及O139霍乱弧菌O-抗原基因的结构和功能研究提供了条件。
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