粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1在大肠杆菌中的分泌表达及其条件优化

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克隆粘质沙雷氏菌PL-06磷脂酶A1基因plaA,与载体pET-22b(+)连接构建重组质粒pET-22b(+)-plaA,并将重组质粒导入受体菌E.coli BL21(DE3)中表达,构建得到重组菌AP22,IPTG诱导表达目的蛋白后将培养基蛋白进行SDS—PAGE分析显示:重组蛋白以可溶性蛋白的形式大量存在于发酵液中,分子质量约35ku,与预期蛋白大小一致。以磷脂酶A1酶活为指标,在单因素实验的基础之上,通过正交实验得到摇瓶培养最佳条件为:氨苄青霉素终浓度30μg/mL,IPTG加量0.25mmol/
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