目的观察无血清微载体培养对永生化人肝细胞(IHH)凝血因子mRNA和蛋白表达的影响,以进一步提高生物人工肝的安全性。方法实验分为有血清微载体培养IHH组和无血清微载体培养IHH组,分别培养0、5、10、15、20 d后观察两组细胞的增殖情况;应用RT-PCR和Western-blot方法检测两种培养方式对IHH凝血因子I、II、V、VII、VIII、IX、X、XI的mRNA和蛋白表达的影响。结果经0、5、10、15、20 d培养后,镜下两组细胞同时间点细胞密度相似,细胞活力差异无统计学意义(P>0.05)。RT-PCR结果显示两组细胞均能表达FI、FII、FV、FVII、FVIII、FIX、FX、FXI的mRNA,无血清培养组mRNA表达量相对较高(P<0.05)。Western-blot结果显示两组细胞均可表达以上8种凝血因子蛋白,两组细胞的FI、FII、FVIII、FX、FXI蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05),无血清培养组FV、FVII、FIX的蛋白表达量相对增高(P<0.05)。结论成功建立无血清微载体培养IHH体系,且无血清微载体培养对IHH凝血因子的产生影响不大。