【摘 要】
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目的 探究脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)过表达及沉默对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响.方法 将含CRMP2过表达载体、CRMP2空载体、CRMP2沉默载体及CRMP2扰乱载体的慢病毒感染并筛选SH-SY5Y细胞,分别命名为CRMP2过表达组、空载体组、CRMP2沉默组及扰乱载体组.采用荧光检测和Western blot分别验证感染效率和CRMP2过表达及沉默效果.四组细胞均用终浓度为3μmol/L的Aβ25-35孵育处理24 h诱导细胞损伤,采用MTT实验、LDH实验及Hoechst 3
【机 构】
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山西医科大学药理学教研室,太原 030001;细胞生理学教育部重点实验室,山西医科大学生理学系;山西医科大学化学教研室;山西医科大学微生物与免疫学教研室
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目的 探究脑衰反应调节蛋白2(CRMP2)过表达及沉默对Aβ25-35诱导SH-SY5Y细胞损伤的影响.方法 将含CRMP2过表达载体、CRMP2空载体、CRMP2沉默载体及CRMP2扰乱载体的慢病毒感染并筛选SH-SY5Y细胞,分别命名为CRMP2过表达组、空载体组、CRMP2沉默组及扰乱载体组.采用荧光检测和Western blot分别验证感染效率和CRMP2过表达及沉默效果.四组细胞均用终浓度为3μmol/L的Aβ25-35孵育处理24 h诱导细胞损伤,采用MTT实验、LDH实验及Hoechst 33258实验分别检测细胞活性、细胞毒性及细胞凋亡.结果 荧光检测结果显示,各组慢病毒感染效率均达95％以上.Western blot检测结果显示,与扰乱载体组相比,CRMP2沉默组CRMP2蛋白表达减少(P<0.01).与空载体组相比,CRMP2过表达组CRMP2蛋白表达增加(P<0.01).MTT实验、LDH实验及Hoechst 33258实验结果显示,与扰乱载体组相比,CRMP2沉默组细胞活性增加、细胞毒性降低及细胞凋亡减少(均P<0.05);与空载体组相比,CRMP2过表达组细胞活性降低、细胞毒性增加及细胞凋亡增多(均P<0.01).结论 CRMP2过表达对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有促进作用,CRMP2沉默对Aβ25-35诱导的SH-SY5Y细胞损伤具有抑制作用.
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