【摘 要】
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目的:克隆人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因并在真核细胞中表达.方法:以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板,采用RT-PCR法得到OPG/OCIF的编码区cDNA,构建真核表达载
【机 构】
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第四军医大学西京医院全军骨科研究所,第四军医大学分子生物学与生物化学教研室
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目的:克隆人破骨细胞生成抑制因子(OPG/OCIF)编码区基因并在真核细胞中表达.方法:以人骨肉瘤细胞系MG63的总RNA为模板,采用RT-PCR法得到OPG/OCIF的编码区cDNA,构建真核表达载体pIRES2-OPG-EGFP,在脂质体介导下转染小鼠成肌细胞系C2C12,经G418压力筛选建立稳定转染人OPG/OCIF的细胞系,共聚焦荧光显微镜及核酸杂交方法检测OPG/OCIF在细胞中的表达.结果:获得的人OPG/OCIF编码区全长cDNA序列与文献报道的核苷酸序列一致,核酸杂交证实稳定转染人OPG
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