【摘 要】
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目的 探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响.方法 将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组.采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Hep-2细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细
【机 构】
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邯郸市中心医院耳鼻喉科,河北 邯郸056001
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目的 探讨微小RNA(miR-107)调控内质网应激对喉癌Hep-2细胞增殖和凋亡的影响.方法 将miR-107类似物和阴性对照片段转染至对应组细胞中,以未转染组作为空白组.采用荧光定量PCR(RT-PCR)检测各组Hep-2细胞中miR-107相对表达量,用蛋白质印迹法(Western blotting)检测各组Hep-2细胞中的内质网应激有关蛋白即蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)及活化转录因子4(ATF4)蛋白的表达,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法测定Hep-2细胞的增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡情况.结果 三组转染细胞miR-107相对表达量差异有统计学意义(χ2=11.50,P<0.05).其中mimics组miR-107的相对表达量为(15.32±1.94),与mimics组相比较,NG组、空白组miR-107相对表达量均降低(P<0.05).三组转染细胞的PERK和ATF4蛋白表达水平均差异有统计学意义(F=70.35、13.77,P<0.05).其中mimics组PERK和ATF4蛋白的相对表达量为(0.53±0.07)和(0.75±0.06),与mimics组相比较,NG组和空白组的PERK和ATF4蛋白相对表达量均降低(P<0.05).MTT分析结果显示,三组细胞的增殖能力差异有统计学意义(F=21.44、28.38、59.14,P<0.05).其中mimics组Hep-2细胞增殖能力在12、24、36 h时分别为(0.15±0.01)、(0.33±0.03)和(0.47±0.04),与mimics组比较,在12、24、36 h后NG组、空白组Hep-2细胞增殖能力均有显著升高(P<0.05).三组转染细胞的细胞凋亡率比较差异有统计学意义(F=102.32,P<0.05).其中mimics组Hep-2细胞凋亡率为(10.18±0.93),与mimics组相比较,NG组和空白组的细胞凋亡率均降低(P<0.05).结论 上调miR-107的表达能够抑制Hep-2细胞的增殖,促进Hep-2细胞凋亡,内质网应激可能在其中有重要作用.
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