【摘 要】
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目的构建和筛选特异性抑制Dishevelled 2（Dvl2）表达的siRNA载体,为进一步研究Dvl2在破骨细胞分化及骨重建中的作用、筛选调节骨重建潜在靶点而奠定基础。方法根据目的基因设计5
【机 构】
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浙江大学医学院附属口腔医院修复科,浙江大学医学院附属第一医院口腔科
【基金项目】
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国家自然科学基金资助项目（30700958）, 浙江省自然科学基金资助项目（Y2100333）
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目的构建和筛选特异性抑制Dishevelled 2（Dvl2）表达的siRNA载体,为进一步研究Dvl2在破骨细胞分化及骨重建中的作用、筛选调节骨重建潜在靶点而奠定基础。方法根据目的基因设计5个siRNA靶点,与pMAGic 4.0载体形成重组质粒,转化DH5α感受态细胞,含抗生素的LB琼脂平板上筛选转化子,菌落PCR鉴定阳性克隆,测序验证正确的转化子,质粒抽提,Lipofectamine 2000将质粒瞬时转染RAW264.7细胞,通过绿色荧光信号观察转染,实时定量RT-PCR检测Dvl2基因表达的变化
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