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目的 培养胶质母细胞瘤干细胞,观察微小RNA (miR)-203对其干细胞的影响,探讨其在胶质母细胞瘤基因治疗中的应用.方法 体外原代培养胶质母细胞瘤组织,免疫磁珠法分选CD133+细胞;免疫荧光染色检测分选后细胞CD133、巢蛋白(Nestin)、神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、微管相关蛋白2(MAP2)的表达.将人miR-203模拟体和无意义寡核苷酸链(NC)分别转染胶质母细胞瘤干细胞作为miR-203组、NC组,用成球试验检测miR-203对胶质母细胞瘤干细胞自我更新能力的影响.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、免疫荧光染色分别检测两组细胞CD133、Nestin、GFAP、MAP2的mRNA和蛋白的表达.结果 培养的胶质母细胞瘤干细胞表达干细胞标记物CD133、Nestin,分化后细胞表达星形胶质细胞的标志物GFAP、神经元的标志物MAP2;转染后7d,当NC组细胞球数目为100％时,miR-203组一、二次球数目分别为(67.84±13.79)％和(30.53±8.91)％,差异均有统计学意义(P＜0.05);RT-PCR结果显示与NC组比较,miR-203组细胞CD133mRNA的相对表达水平为0.29±0.15,nestin mRNA为0.27±0.18;GFAP、MAP2mRNA表达升高,分别为7.89±3.99和2.59±1.16,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 miR-203可以抑制胶质母细胞瘤干细胞的自我更新能力并促进其多向分化,可能成为新的针对胶质母细胞瘤的治疗策略.