探讨非红细胞血影蛋白-β2(SPTBN2)在肺腺癌(LUAD)组织中的表达水平及其对肺腺癌细胞体外迁移、增殖、侵袭的影响。
方法通过基因表达数据库(GEO)下载的3个肺腺癌数据集验证SPTBN2在肺腺癌与正常肺组织中的差异表达。通过癌症基因组图谱(TCGA)分析SPTBN2在肺腺癌(LUAD)患者的预后中所起到的作用。收集2019年7月至2020年9月在郑州大学第一附属医院胸外科经手术证实为肺腺癌患者40例,收取癌组织标本及相应的癌旁组织标本,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肺腺癌组织和癌旁组织中SPTBN2的mRNA表达水平。选择人肺腺癌细胞系A549按实验转染方案随机分组,分为空白(Blank)组、沉默SPTBN2 (si-SPTBN2)阴性对照(NC)组、si-SPTBN2组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测细胞增殖能力;采用划痕实验及Transwell小室法检测细胞迁移和侵袭能力。计量资料组间比较采用t检验。
结果分析GSE10072(t=7.552,P<0.01),GSE19188(t=8.059,P<0.01)和GSE32863(t=9.196,P<0.01)数据集,SPTBN2在肺腺癌组织中的表达水平明显高于正常肺组织。TCGA数据库KM-PLOTTER生存分析网站进行生物信息学分析,显示SPTBN2高表达是肺腺癌患者预后的危险因素(P<0.01)。实时荧光定量RT-qPCR检测肺腺癌组织中SPTBN2的表达(7.922±0.956)高于正常肺组织(5.726±1.343,t=3.766,P<0.01),差异有统计学意义。CCK-8结果显示敲低si-SPTBN2实验组的细胞增殖能力明显低于si-SPTBN2 NC对照组(24 h:0.439±0.011比0.495±0.007,t=7.974,P<0.01;48 h:0.509±0.022比0.659±0.023,t=9.577,P<0.01;72 h:0.917±0.033比1.687±0.027,t=34.320,P<0.01;96 h:1.294±0.749比2.930±0.059,t=3.660,P<0.01)。划痕实验结果显示,si-SPTBN2的实验组在划痕48 h后相较于对照组迁移距离更短[划痕愈合比:(36.56±3.02)%比(51.94±5.72)%,P<0.01]。Transwell迁移、侵袭实验结果表明,敲低SPTBN2可使肺腺癌细胞的迁移能力显著低于对照组[(362±18)个比(977±25)个,t=35.750,P<0.01],侵袭能力显著低于对照组[(152±9)个比(770±34)个,t=43.920,P<0.01],差异均有统计学意义。
结论SPTBN2在肺腺癌中高表达,与不良预后相关,具有促进肺腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的作用。