研究铝对大鼠原代脉络丛上皮细胞的损伤作用。
方法在无菌条件下,取出生后14 d SD大鼠的脉络丛组织,经眼科剪剪碎,胰酶消化后,将悬浮细胞分别接种于含1%表皮生长因子(EGF)、20%胎牛血清的DMEM培养基中。5 d后,玻片上的细胞用特异性转甲状腺素蛋白抗体(anti-TTR)做免疫组化鉴定其纯度。以不同剂量[对照组、低剂量组(100 μmol/L)、中剂量组(400 μmol/L)、高剂量组(1 600 μmol/L)]乳酸铝处理生长状态良好的细胞,48 h后分别测定各组细胞存活率、细胞凋亡率、活性氧(ROS)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活力,评估铝对原代脉络丛上皮细胞的损伤作用。
结果经纯度鉴定95%以上培养细胞为脉络丛上皮细胞。与对照组(100%)比较,中(86.74%±4.03%)、高剂量组(81.90%±9.17%)细胞存活率明显下降,差异有统计学意义(P<0.01);与低剂量组(92.92%±8.81%)比较,高剂量组细胞存活率明显下降,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组(1.29%±0.03%)、低剂量(1.68%±0.27%)比较,中(7.26%±0.99%)、高剂量组(22.25%±1.55%)凋亡率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.01);与中剂量组相比,高剂量组凋亡率明显升高,差异有统计学意义(P<0.01)。与对照组(17.24%±0.09%)和低剂量组(18.31%±0.21%)比较,中(22.23%±0.41%)、高剂量组(25.10%±1.13%)ROS荧光强度增加,差异有统计学意义(P<0.05);与中剂量组相比,高剂量组ROS荧光强度增加,差异有统计学意义(P<0.05)。与对照组[(37.35±1.05)U/g Hb]比较,低[(28.65±0.74)U/g Hb]、中[(22.75±1.94)U/g Hb]、高剂量组[(13.29±0.64) U/g Hb]SOD活力均下降,差异有统计学意义(P<0.05);与低剂量组比较,中、高剂量组SOD活力下降,差异有统计学意义(P<0.05);与中剂量组相比,高剂量组SOD活力下降,差异有统计学意义(P<0.05)。其他各组间差异无统计学意义(P>0.05)。
结论乳酸铝可能造成大鼠原代脉络丛上皮细胞损伤,使其存活率下降,凋亡率升高,并引起细胞的氧化应激损伤。