一氧化碳释放分子3对大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤的影响

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目的

评价一氧化碳释放分子3(CORM-3)对大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤的影响。

方法

清洁级SD大鼠,1~3日龄,原代培养心肌细胞后第5天,采用随机数字表法分为6组(n=36):正常对照组(C组)、缺氧缺糖/复氧复糖组(OGD/R组)、缺氧缺糖/复氧复糖+灭活的CORM 50 μmol/L(iCORM-3)组(iC组)、缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 12.5 μmol/L组(C1组)、缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 25.0 μmol/L组(C2组)和缺氧缺糖/复氧复糖+CORM-3 50.0 μmol/L组(C3组)。在培养箱(1%O2-5%CO2-94%N2)中无糖无血清培养基孵育3 h,随后更换DMEM低糖培养基正常培养6 h以制备缺氧缺糖/复氧复糖损伤模型。于缺氧缺糖即刻,C1组、C2组和C3组无糖培养基中加入相应终浓度的CORM-3,iC组加入iCORM-3(终浓度50 μmol/L),复氧复糖时弃去含干预药物无糖培养基。复氧复糖6 h时观察心肌细胞病理学结果,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,乳酸-丙酮酸法测定细胞上清液乳酸脱氢酶(LDH)活性,采用流式细胞术检测早期凋亡率。

结果

与C组比较,其余5组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高(P<0.05);与OGD/R组和iC组比较,C1组-C3组细胞增殖增多,上清液LDH浓度和早期凋亡率降低(P<0.05);与C1组比较,C2组和C3组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高(P<0.05);与C2组比较,C3组细胞增殖减少,上清液LDH浓度和早期凋亡率升高(P<0.05)。C1组-C3组心肌细胞病理学损伤较OGD/R组减轻,尤以C1组显著。

结论

CORM-3可减轻大鼠心肌细胞缺氧缺糖/复氧复糖损伤,随浓度升高该效应减弱。

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