论文部分内容阅读
为了实现Mn-SOD基因在大肠杆菌(E.coli)中的可溶性表达,根据枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)168sodA核酸序列设计引物,以枯草芽孢杆菌ATCC9372基因组为模板,PCR扩增获得了Mn-SOD基因。将此基因重组至原核表达载体pET-28a,构建含Mn—SOD基因的重组表达质粒,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)。异丙基.p.D.硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达获得Mn-SOD,蛋白分子量约为26kD,占全菌蛋白的45.6%。改良的连苯三酚自氧化法测定SOD活力,菌体可溶性总