【摘 要】
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目的 通过检测microRNA-21 (miR-21)及其靶基因程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)基因在结肠癌细胞中对下游通路的调控,研究高表达的miR-21在结肠癌细胞中
【机 构】
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四川大学生命科学学院, 成都,610064西南交通大学生命科学与工程学院;
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目的 通过检测microRNA-21 (miR-21)及其靶基因程序性细胞死亡因子4(programmed cell death 4,PDCD4)基因在结肠癌细胞中对下游通路的调控,研究高表达的miR-21在结肠癌细胞中对5-氟尿嘧啶(5-fuorouracil,5-FU)耐药的可能机制.方法 MTT法检测5-FU处理后miR-21敲除或PDCD4高表达对RKO细胞存活率的影响;流式细胞术检测5-FU处理后RKO-敲除型与RKO-野生型细胞凋亡;定量PCR检测miR-21敲除后以及PDCD4高表达后RKO细胞中ABCC5及CD44 mRNA水平的变化.结果 5-FU对RKO-野生型的半抑制浓度(IC50)值(52.28±0.05)μmol/L比RKO-敲除型的IC50值(32.13±0.05) μmol/L高67％,同时miR-21敲除后细胞凋亡率显著增加;PDCD4在RKO-敲除型细胞中显著高表达,并且高表达的PDCD4能够负调控转运蛋白ABCC5及干细胞表面标记CD44.结论 miR-21很可能通过抑制靶基因PDCD4调控转运蛋白ABCC5及干细胞表面标记CD44的表达,从而增强RKO细胞对5-FU的耐药性.
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