小鼠骨髓干细胞诱导分化为肝细胞的实验研究

来源 :中华肝脏病杂志 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yipan1975
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目的 探讨成年小鼠骨髓干细胞在肝细胞生长因子(HGF)作用下分化为肝细胞的可能性及其分化特性,为肝细胞移植提供实验基础.方法 HGF 100ng/ml体外诱导小鼠骨髓干细胞向肝细胞分化,于诱导的第0、7、14、21、28天,观察细胞形态特征;半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测细胞白蛋白(ALB)、甲胎蛋白(AFP)mRNA水平的表达;免疫细胞化学法检测ALB、AFP和细胞角蛋白19(CK19)蛋白水平的表达.结果新鲜分离的骨髓干细胞ALB及AFP mRNA呈弱阳性.在非诱导组,培养7d时ALB mRNA已检测不到,AFP mRNA明显减弱,14 d时消失.在诱导组,7 d时ALB mRNA检测不到,14 d时再次出现阳性条带,21 d时表达量最大,而AFP mRNA在诱导组始终呈阳性,14 d时表达量最大,以后逐渐减少.免疫细胞化学结果与RT-PCR结果基本一致,但CK19蛋白始终阴性.结论小鼠骨髓干细胞在HGF单独作用下能诱导分化为肝细胞样细胞,诱导分化的最佳时期是2~3周。

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