流感病毒RNA聚合酶串联亲和纯化方法的建立

来源 :中国预防兽医学报 | 被引量 : 0次 | 上传用户：luckyhelen

【摘要】

：

为建立流感病毒RNA聚合酶的串联亲和纯化方法,本实验由鸡胚尿囊液中提取病毒核酸,经过RT-PCR和常规PCR方法扩增禽流感病毒株A/Duck/Guangxi/35/01（H5N1）的PB1、PB2和PA的cDNA。

【作者】

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李印邓国华崔佳莹于洋丁晴薇陈化兰

【机构】

：

中国农业科学院哈尔滨兽医研究所农业部动物流感重点开放实验室／兽医生物技术国家重点实验室,华南农业大学,湖南农业大学

【出处】

：

中国预防兽医学报

【发表日期】

：

2011年11期

【关键词】

：

H5亚型禽流感病毒 RNA聚合酶复合体串联亲和纯化 H5 subtype avian influenza virus RNA polymerase tan

【基金项目】

：

国家十五重点科技攻关课题（2004BA519A054）

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为建立流感病毒RNA聚合酶的串联亲和纯化方法,本实验由鸡胚尿囊液中提取病毒核酸,经过RT-PCR和常规PCR方法扩增禽流感病毒株A/Duck/Guangxi/35/01（H5N1）的PB1、PB2和PA的cDNA。分别将PB2基因连接于pcDNATAP载体中,PB1和PA基因连接于pcDNA3A载体中构建了pcDNA-35PB2TAP、pcDNA-35PB1和pcDNA-35PA重组质粒。将构建的真核表达重组质粒共转染293T细胞,经过串联亲和纯化方法获得流感病毒依赖RNA的RNA聚合酶复合体（RdRp）

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