【摘 要】
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目的 探讨应用淫羊藿苷促进人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成软骨分化的可行性及效果.方法 体外分离培养hMSCs,取第3代细胞实验.将hMSCs分别用无血清高糖培养基(H-DMEM)和含1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L淫羊藿苷的软骨诱导液(CM)诱导,显微镜下观察细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖.以5×109/L的细胞密度离心构建微团,诱导培养3周
【机 构】
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430034武汉,华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科,430034武汉,华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科,430034武汉,华中科技大学同济医学院附属普爱医院骨科,430034武汉,华中科技
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目的 探讨应用淫羊藿苷促进人骨髓间充质干细胞(hMSCs)成软骨分化的可行性及效果.方法 体外分离培养hMSCs,取第3代细胞实验.将hMSCs分别用无血清高糖培养基(H-DMEM)和含1×10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L淫羊藿苷的软骨诱导液(CM)诱导,显微镜下观察细胞形态变化,噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的增殖.以5×109/L的细胞密度离心构建微团,诱导培养3周.逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测各组蛋白多糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达.免疫组织化学、甲苯胺蓝染色检测Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达.结果 5组微团分别由无血清H-DMEM、含1 × 10-8、1×10-7、1×10-6、1×10-5mol/L淫羊藿苷的CM诱导3周后,除H-DMEM组无Ⅱ型胶原和蛋白多糖表达外,其他各组Ⅱ型胶原蛋白和蛋白多糖的表达呈浓度依赖性增加,ImagePro Plus 6.0软件测得各组Ⅱ型胶原平均吸光度(A)值分别为0.0214±0.0035、0.1182 ±0.0105、0.1886 ±0.0184、0.2903±0.0261、0.3476±0.0287,各组差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 淫羊藿苷能促进hMSCs成软骨分化,软骨分化程度呈浓度依赖性增加。
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