为了构建具有发夹结构的RNAi表达载体来研究拟南芥AtZFN3基因表达的效果。根据拟南芥(Arabidopsis thaliana)锌指蛋白AtZFN3基因序列，设计含有酶切位点的两对特异性引物。以拟南芥cDNA为模板，分别合成用于构建干扰载体的正、反义DNA片段，将正、反义片段分别插入表达载体pART27的相应位置上，构建含有发夹结构的RNAi载体pART-ZFN3。利用农杆菌介导法，将pART- ZFN3转化到拟南芥中，PCR检测证实获得了5株转基因植株，经荧光定量PCR检测，证明了转基因植株中AtZFN3基因表达量显著低于未转基因的植株。结果表明：具有发夹结构的RNAi 载体pART-ZFN3已构建成功，它对拟南芥AtZFN3基因的表达具有抑制作用，为深入分析拟南芥AtZFN3基因功能提供了基础。