【摘 要】
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背景:利用骨髓间质干细胞(mesenchymal stem ceUs,MSCs)的多向分化性,选择合适的生物材料和适当的生长因子联合应用,可达到修复组织缺损的目的,MSCs细胞具有取材方便,对身体
【机 构】
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苏州大学附属儿童医院骨科,江苏省苏州市,215003苏州大学生命科学院生物技术研究所,江苏省苏州市,215007;
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背景:利用骨髓间质干细胞(mesenchymal stem ceUs,MSCs)的多向分化性,选择合适的生物材料和适当的生长因子联合应用,可达到修复组织缺损的目的,MSCs细胞具有取材方便,对身体健康损害小,来源于自体干细胞诱导构建的组织不存在MHC限制等优点,所以日益受到人们的重视.目的:探讨人骨髓间充质干细胞向成骨和成软骨细胞诱导分化的能力.设计:单一样本研究.单位:苏州大学附属儿童医院骨科,苏州大学生命科学院生物技术研究所.材料:RPMI1640完全培养基,地塞米松,β-甘油磷酸钠,抗坏血酸,鼠抗人一抗,羊抗鼠二抗,链球菌亲和素(三抗),DAB(1:50),100mL/L胎牛血清,维生素C,转化生长因子-β1(TGF-β1)等.方法:选用不同代次的MSCs细胞,分别使用成骨和成软骨条件培养基培养,观察细胞的形态学变化,同时采用细胞化学和免疫组化的方法检测碱性磷酸酶,钙盐沉积,糖胺多糖分泌和Ⅰ,Ⅱ胶原的表达.主要观察指标:骨髓基质干细胞向成骨细胞分化;骨髓基质干细胞向成软骨细胞分化.结果:MSCs细胞在地塞米松、维生素C和β-甘油磷酸钠的作用下,15 d后可见细胞变为多边形,ALP和Ⅰ型胶原染色阳性,形成钙结节,表现成骨细胞分化特点;而在维生素C和TGF-β1的作用下,7 d可见细胞多为圆形,糖胺多糖和Ⅱ型胶原染色阳性,表现成软骨细胞分化特点.但细胞分化特征的表达随细胞增殖有减弱趋势.结论:在一定培养条件下成功诱导人MSCs细胞向成骨和成软骨细胞分化,为进一步研究打下基础.
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