本研究通过HaCaT细胞体外研究观察不同浓度(包括生理浓度)维生素D3(VD3)对表皮细胞迁移的影响并初步探索其迁移调控机制。
方法选用不同浓度VD3(0 nmol/L、102 nmol/L、10 nmol/L、10－1 nmol/L、10－3 nmol/L及10－5 nmol/L)的处理HaCaT细胞(上海中国科学院细胞研究所)后，通过划痕实验、活细胞工作站实验、免疫荧光染色实验和免疫印迹实验观察HaCaT细胞迁移运动和检测α-微管蛋白(α-tubulin)的表达并通过t检验评估组间差异，研究其迁移调控机制。
结果与对照组比较(VD3浓度0 nmol/L)，高浓度VD3组(102、10 nmol/L)HaCaT细胞呈现出更小的迁移范围和速率，α-tubulin表达增高(53.650±5.414和65.370±4.512比76.110±4.386，t＝3.224、2.357，P<0.05；29.140±0.678比32.780±1.311，t＝2.467，P<0.05；18.070±0.792和16.830±1.028比14.830±0.741，t＝3.254、2.336，P<0.05)。生理浓度VD3组(10－1 nmol/L)HaCaT细胞表现为更大的迁移范围和速率，α-tubulin表达降低(87.010±1.936比76.110±4.386，t＝2.274，P<0.05；41.210±2.044比32.780±1.311，t＝3.472，P<0.05；11.350±0.691比14.830±0.741，t＝3.425，P<0.05)。低浓度VD3组(10－3、10－5 nmol/L)HaCaT细胞迁移的范围、速率和α-tubulin表达与对照组比较差异无统计学意义(79.360±6.036和72.370±2.990比76.110±4.386，t＝0.298、0.687，P>0.05；34.150±1.588和33.240±1.055比32.780±1.311，t＝0.666、0.289，P>0.05；14.310±1.115比14.830±0.741，t＝0.403，P>0.05)。
结论VD3通过微管动力学来调控表皮细胞的迁移，其作用具有双相性和浓度选择性。该研究为进一步揭示局部皮肤VD3应用浓度对伤口愈合作用的细胞和分子机制提供基础。